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点突变
点突变核心技术: • 点突变
点突变

许多疾病由氨基酸突变引起,为了构建此类疾病模型,可以将小鼠的对应基因的位点进行突变。单链DNA在点突变方面有较高的成功率。


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图1 单链DNA模板制备点突变小鼠。


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图2 PCR扩增包含突变位点的序列,测序检测发生点突变的小鼠,目标碱基出现套峰,证明获得杂合突变小鼠。


技术一般的流程

gRNA设计→ 供体DNA合成→ 显微注射(EPS打靶)→ 小鼠鉴定。


技术优势或适合应用的研究

-氨基酸突变类小鼠疾病模型模拟

-CRISPR点突变效率相对较高



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