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基因替换
基因替换核心技术: • 基因替换
基因替换

基因替换指,根据研究需要,将小鼠的基因替换为其它物种的基因。可以将基因的部分功能区,或者全基因进行替换。1kb以下的小片段替换,可以采用CRISPR/Cas9策略。对于大片段的基因替换,需要使用ES,或者EPS制备策略才能成功。


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图1:用其它种系的基因,替换小鼠的基因片段。


技术一般的流程+图解

打靶载体设计→ 载体构建→ 显微注射(EPS打靶)→ 小鼠鉴定。


技术优势或适合应用的研究

-CRISPR用于小片段的基因替换。

-ES/EPS用于大片段基因替换。


3)基因人源化小鼠的制备,如PD1等免疫检查点人源化小鼠的制备。


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图1 EPS小片段敲入效率高达90%


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图2 EPS系统对于长达20kb的大片段敲入,也具有很高的效率。


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