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基因敲入
基因敲入核心技术: • 基因敲入
基因敲入

基因敲入是指在基因组的特定位置插入一段DNA序列,例如给基因加GFP荧光标签标记蛋白,原位敲入制备Cre工具鼠等应用。1kb以下的小片段插入,CRISPR/Cas9效率较高。对于大片段的基因插入,需要使用ES,或者EPS制备策略才能保证项目周期和效率。


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图1:把绿色荧光蛋白敲入目的基因的C端,融合表达,示踪目的基因。


技术一般的流程+图解

打靶载体设计→ 载体构建→ 显微注射(EPS打靶)→ 小鼠鉴定。


技术优势或适合应用的研究

-CRISPR用于小片段的基因敲入。

-ES/EPS用于大片段基因敲入。

-给基因加各种标签,原位敲入制备Cre工具鼠。